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最佳答案：DNA合成,新链的延伸方向是5→3因此,需要在5端加上酶切位点记得再加上一些保护碱基,因为内切酶除了有特异的识别位点之外,还需多几个无需特异性的碱基提供一个pl
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最佳答案：第一次的引物再用,效果不好,酶需要一些额外片段来结合在模板上,所以第二对引物要靠里.引物不同,能增加特异性,这也是巢式PCR的意义所在啦.看到图片会更好理解哈:
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最佳答案：可以下载专门设计引物的生物学软件,如primer premier,将已知序列导入该程序,程序会自动生成一条正向引物和一条反向引物,并计算出Tm值.引物的长度在p
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最佳答案：目前发现的大多数lncRNA都带有poly(A),可以通过Oligo(dT)、随机引物进行反转录扩增合成cDNA
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最佳答案：你问问实验室的同学 肯定有人有电话的
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最佳答案：又不一定非要从那个基因的头开始P,只要把那个基因整个包含进去就行了,如果你非要刚好从头开始那就只能分段P然后再连啦,其实高度相似不是完全相同吧 还是可以的 毕竟
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最佳答案：?问题很模糊呵如果扩基因用于表达,一般使用cDNA做为模板,引物设计时要保证产物包含ATG-TGA的编码序列,两者常设计成直接在引物靠3’端,而5'端引入些酶切
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最佳答案：引物： 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度.理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链
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最佳答案：可以使用primer5 或者primerdesign设计 还是主要考虑发夹结构,GC含量,Tm值和引物交叉,还有减少引物二聚体的产生.如果是扩增启动子的话,建议
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最佳答案：拼接的cDNA序列结果有可能会出现各种各样的情况,没有完整的ORF的话建议你去blast一下基因组序列（如果你所做的物种的基因组已经测的差不多的话）,如果在基因