如何将酶从细胞中分离?

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  • 植物细胞有坚韧的细胞壁,需要强烈的方法去破碎,少量样品可用研钵加石英砂研磨,或用玻璃匀浆器.大量样品则需用电动匀浆器.为减低研磨或匀浆过程中发热,所用器皿和溶液需要预冷,提取液的用量一般为组织的1梍5倍,用量大些有利于提高得率,但工作量大,一般宁可用量小些,将残渣再提取一次.提取匀浆时加入酚类结合剂PVPP,金属螯合剂 Na2─EDTA,以及─SH化合物以保护蛋白质,或加入非离子型去垢剂如Triton X─100,以增加蛋白质的可溶度,常用于与膜脂结合的酶.总之,可以通过试验以确定提取蛋白质的最佳条件.