解题思路:分析题图:图示为提高葡萄糖异构酶热稳定性的过程.在确定第138位甘氨酸为目标氨基酸后,对葡萄糖异构酶基因进行体外定点诱变,以脯氨酸138替代甘氨酸138,含突变体的重组质粒在大肠杆菌中表达,结果突变型葡萄糖异构酶比野生型的最适反应温度提高10~12℃,酶的热稳定性得到了提高.
(1)蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行基因改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需要.蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第二代基因工程.由于葡萄糖异构酶发生了变化,所以该过程属于蛋白质工程.因此对葡萄糖异构酶进行定点诱变的过程体现了蛋白质工程和基因工程现代生物技术的综合运用.
(2)图中1是基因表达载体,至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因和复制原点.
(3)将目的基因导入微生物细胞时,常采用感受态细胞法,即用Ca2+处理大肠杆菌,使大肠杆菌处于易于吸收周围环境中DNA分子的感受态,进而将目的基因导入受体细胞.
(4)工业生产上为了充分利用葡萄糖异构酶,常采用固定化酶技术;固定化酶技术的优点有:①提高了酶的利用率;②降低了生产成本,提高了产物的产量和质量.
(5)由图可知,脯氨酸与甘氨酸的密码子有两个碱基不同,所以基因中发生了两对碱基的替换.
故答案为:
(1)蛋白质工程 基因工程
(2)基因表达载体 启动子
(3)Ca2+
(4)固定化酶 ①提高了酶的利用率 ②降低了生产成本,提高了产物的产量和质量
(5)替换
点评:
本题考点: 蛋白质工程;制备和应用固相化酶;基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题结合提高葡萄糖异构酶热稳定性的过程图解,考查蛋白质工程、基因工程和固定化酶技术,要求考生识记蛋白质工程的概念,明确蛋白质工程和基因工程之间的关系;识记基因工程的基本操作步骤;识记固定化技术的优点,能结合图中信息答题.