解题思路：本题是关于高中生物教材实验的实验原理和具体操作的题目，根据选项涉及的具体实验梳理相关知识点，然后对选项进行判断．
①观察植物细胞质壁分离和复原的实验，必须始终保持细胞的活体状态，而有丝分裂的实验的解离步骤细胞已经被杀死了，①错误；
②使用显微镜时，当由低倍物镜换成高倍物镜时，细胞变大，数量变少，视野变暗，此时应调节反光镜或调大光圈使视野变亮，②正确；
③酒精可与酸性重铬酸钾溶液反应生成灰绿色，③错误；
④双缩脲试剂和斐林试剂的浓度以及使用方法是不一样的，所以鉴定蛋白质时，双缩脲试剂不可用斐林试剂代替，④错误；
⑤探究温度对酶活性影响的实验中，若使试剂改为豆浆、蛋白酶和双缩脲试剂，由于蛋白酶本身也是蛋白质，也能与双缩脲试剂反应产生紫色，所以不能得到相同结论，⑤错误．
故选：B．
点评：
本题考点： 观察植物细胞的质壁分离和复原；检测蛋白质的实验；细胞观察实验；探究影响酶活性的因素；观察细胞的有丝分裂．
考点点评： 本题考查生物学科实验的原理和技术，熟悉实验的相关原理和现象即可选出正确选项，属于中等难度题．