解题思路：影响酶活性的因素主要有温度和pH，探究温度对酶活性影响时，实验设计要遵循对照原则和单一变量原则，该实验的单一变量是温度，因变量是酶活性．在实验过程中，要先设置对应的温度，再加入淀粉酶，最后进行鉴定和观察．
探索温度对酶活性影响的实验中，单一变量是温度．该实验中需要先设置温度，再加入酶，最后鉴定和观察，所以操作步骤为：①取3支试管，编号并注入2mL淀粉溶液；④将3支试管分别放在60℃的热水，沸水和冰块中维持温度5min；②向各试管注入1mL淀粉酶溶液，并继续维持原先温度；③向各试管滴1滴碘液；⑤观察实验现象．
故选：D．
点评：
本题考点： 探究影响酶活性的因素．
考点点评： 本题考查探究温度对酶活性影响的实验，要求考生掌握实验设计的原则，能根据对照原则和单一变量原则设计实验，需要注意的是这类实验要先设置相应的条件（本实验中是温度），再加入酶，顺序不能颠倒，否则会导致实验失败．