已知某一基因mRNA序列,如何设计实验在相应细胞水平表达该基因编码的蛋白质?

2个回答

  • totalRNA反转录,纯化mRNA,如果知道该序列,用引物调出来后,连到克隆载体,一般T载就可以,亚克隆.

    双酶切转到连到表达质粒载体上,如果只看表达与否,可以连一个标记基因,如GFP或者lux发光基因.

    转染到相应的细胞系,如果验证编码的蛋白的功能,就需要做相应的活性检测了,具体问题具体设计实验.

    当然也可以做个western blot如果有此蛋白的抗体的话.

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