解题思路:PCR技术的相关知识:
1、概念:PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术.
2、原理:DNA复制.
3、前提条件:要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物.
4、过程:①高温变性:DNA解旋过程;②低温复性:引物结合到互补链DNA上;③中温延伸:合成子链.PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶,高温条件下氢键可自动解开.
(1)PCR扩增DNA时要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一对引物,引物不能过短,否则没有一定的特异性,容易导致配对错误.
(2)图甲中②过程是以mRNA为模板合成DNA链过程,该过程需要逆转录酶,过程③是以DNA一条链为模板合成双链DNA过程,需要DNA聚合酶.两个过程都是合成DNA链,所以需要四种脱氧核苷酸作原料.
(3)由图可知,在cDNA和质粒DNA上加上一段寡聚核苷酸的目的是形成黏性末端,由于加上的核苷酸种类相同,所以不存在自身环化或同种DNA两两结合的现象,只能形成1种重组DNA分子.
(4)由PstⅠ酶切结果可知,质粒的长度为4.36kb,PstⅠ和EcoRⅠ切割形成3.61kb和0.75kb,PstⅠ和SalⅠ切割形成3.23kb和1.13kb,所以PstⅠ与EcoRⅠ的距离为0.75kb,EcoRⅠ与SalⅠ的距离为0.38kb,SalⅠ和PstⅠ的距离为3.61kb.
故答案为:
(1)没有一定的特异性,容易导致错配(或影响退火温度)
(2)逆转录酶DNA聚合酶游离的脱氧核苷酸
(3)黏性末端1(或2)同一种DNA的两端的尾巴是相同的,不存在自身环化或同种DNA两两结合的现象
(4)如下图
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题考查基因工程,意在考查考生能从课外材料中获取相关的生物学信息,并能运用这些信息,结合所学知识解决相关的生物学问题.