(2010•朝阳区二模)如图是将人的生长激素基因导入细菌细胞B制造工程菌的示意图.已知细菌细胞B不含质粒A,也不含质粒A

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  • 解题思路:1、PCR全称为聚合酶链式反应,是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术.在模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)为条件下在体外进行DNA复制.具体过程有:高温变性、低温复性、中温延伸.2、若细菌植入到含有四环素的培养基中,如果能生存,说明该菌具有含抗四环素基因的质粒A,如果不能生存,说明该菌没有抗四环素基因质粒A.若细菌植入到含有氨苄青霉素的培养基中,如果能生存,说明该菌具有含抗氨苄青霉素基因的质粒A,如果不能生存,说明该菌没有抗氨苄青霉素基因的质粒A.

    (1)PCR扩增技术是在模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物存在下,依赖于热稳定DNA聚合酶(Taq酶)促合成反应.

    (2)将目的基因与质粒结合形成重组质粒的过程中,需要同一种限制酶切割目的基因和质粒,使他们露出相同的末端,在用DNA连接酶连接形成重组质粒.

    (3)通过抗性基因可以检测目的基因是否导入.据图可知,重组质粒时抗氨苄青霉素基因被破坏,而抗四环素基因没有被破坏.因此可在培养细菌B的培养基中加入四环素,若在培养基上观察到大量的细菌B的菌落,表明目的基因已成功导入细菌B.所用的培养基属于筛选用的.

    (4)通过显微镜直接统计菌落的数目,通过统计菌落的数目来推测活菌数目比实际的数目要少.当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只有一个菌落,不是很精确,所以要设计对照实验来确定统计数目的准确.

    故答案为:

    (1)耐高温的DNA聚合酶

    (2)限制性核酸内切酶、DNA连接酶

    (3)四环素 选择

    (4)显微镜直接计数  少 当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落 对照组

    点评:

    本题考点: 基因工程的原理及技术.

    考点点评: 做本题时要区分DNA连接酶和DNA聚合酶的生理功能,要正确分析抗性基因的生理作用.

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