1,到genebank里面找到几个近缘种的该基因序列,用序列软件(例如DNAMAN)比对一下,在相对保守的区域设计成对引物.
2,查阅一些文献,看要克隆的该基因在哪种组织里面表达量高.然后提取该组织或部位的RNA,反转录成CDNA.以CDNA作为模板进行PCR.
3,跑电泳,若有单一且大小接近的条带,切胶回收.
4,连接入质粒载体,送测序公司或自己测序,与近缘种内该基因比对后,便可确定该物种的该基因序列.
1,到genebank里面找到几个近缘种的该基因序列,用序列软件(例如DNAMAN)比对一下,在相对保守的区域设计成对引物.
2,查阅一些文献,看要克隆的该基因在哪种组织里面表达量高.然后提取该组织或部位的RNA,反转录成CDNA.以CDNA作为模板进行PCR.
3,跑电泳,若有单一且大小接近的条带,切胶回收.
4,连接入质粒载体,送测序公司或自己测序,与近缘种内该基因比对后,便可确定该物种的该基因序列.