解题思路:根据重组质粒上的目的基因若要表达,需要目的基因的首尾含有启动子和终止子分析(1).根据DNA连接酶的功能,基因过程的操作过程分析(2).根据重组质粒上的目的基因若要表达,需要目的基因的首尾含有启动子和终止子分析(3).根据用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因分析(4).根据资料1显示,甲醇为该酵母菌的唯一碳源,同时诱导HBsAg基因表达分析(5).根据原核细胞和真核细胞在细胞器种类上的区别,及细胞器的功能分析(6).
(1)重组质粒上的目的基因若要表达,需要目的基因的首尾含有启动子和终止子.而SnaBⅠ、AvrⅡ识别的序列在启动子与终止子之间,只要在目的基因两侧A和B位置分别接上这两种序列,并用SnaBⅠ、AvrⅡ这两种内切酶对质粒和目的基因同时切割,便会各自出现相同的粘性末端,便于重组与表达,同时防止自身环化,因此在HBsAg基因两侧的A和B位置接上SnaBⅠ和AvrⅡ限制酶的识别序列. (2)①用DNA连接酶将切割后的HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒;②导入大肠杆菌体内,目的是利用大肠杆菌无性繁殖速度,短时间内可获取大量的重组质粒.
(3)重组DNA的两侧分别是启动子和终止子,除BglⅡ外,其它限制酶会破坏含有启动子、终止子的目的基因.
(4)用DNA分子杂交技术检测是否导入目的基因.
(5)资料1显示,甲醇为该酵母菌的唯一碳源,同时诱导HBsAg基因表达.
(6)酵母菌为真核生物,细胞内具有对分泌蛋白加工的内质网和高尔基体等细胞器,细菌等原核生物,不具有内质网和高尔基体等细胞器.
故答案为:
(1)SnaBⅠAvrⅡ避免质粒和目的基因自身环化(或任意连接)
(2)DNA连接酶 大量重组质粒
(3)BglⅡ
(4)DNA分子杂交
(5)甲醇
(6)加工(修饰)
点评:
本题考点: 基因工程的应用.
考点点评: 本题考查了基因工程应用的关知识,考查了学生对相关知识的理解和掌握情况,对图表的分析判断能力.培养学生搜集和处理科学信息的能力,思维能力,分析和解决问题的能力,具有一定的难度.