楼主：你好 一.原理 液-固色谱法”是利用各组分在固定相上吸附能力的不同而将它们分离的方法. 当组分随着流动相通过色谱柱中的吸附剂时,组分分子及流动相分子对吸附剂表面的活性中心发生吸附竞争.组分分子对活性中心的竞争能力的大小决定了它们保留值的大小.被活性中心吸附越强的组分分子越不容易被流动相洗脱,k值就大；反之k值就小.组分之间的k值相差越大,分离越容易. 吸附剂吸附能力的强弱与吸附剂的比表面积、物理化学性质、组分分子的结构和组成以及流动相的性质等因素有关. 二.固定相 液-固吸附色谱所使用的固定相,多数是有吸附活性的吸附剂,常用的有表面多孔型和全多孔微粒型硅胶、氧化铝、分子筛等. 1.表面多孔型：又称薄壳型,是高效液相色谱使用的第一种填料.表面多孔填料的机械强度好,易填充均匀、紧密,渗透性好,表面孔隙浅,传质快,柱效高,分离速度快.其主要缺点是由于比表面积小,柱容量低,允许进样量小. 2.全多孔微粒型：目前广泛使用的有球形和无定形两种,颗粒直径3～10um,它具有粒度小,比表面积大（100～600m2／g）,孔穴浅,柱效高和柱容量大的优点. 三.流动相 实现最佳分离与流动相的选择有关.溶剂的极性是重要的依据.溶剂的极性强弱可用溶剂强度参数e0来衡量.e0越大,表示洗脱剂的极性越强. 吸附色谱流动相的选择原则是极性大的试样需用极性强的洗脱剂,极性弱的试样宜用极性较弱的洗脱剂.实际工作中常用两种或两种以上溶剂按不同比例混合作洗脱剂,以提供合适的溶剂强度和k值,提高分离的选择性.在分离复杂试样时,可进行梯度洗脱,能提高分离效率,改善峰形,加快分析速度.（高效液相色谱法中,流动相选择虽然有一般的指导原则,但主要靠实践经验.）