1.紫外线提前20－30min打开；
2.关紫外灯,开灯,通气,点燃酒精灯；
3.检查细胞生长状况；显微镜下观察各浓度下细胞生长状况（数量、形态、透.亮度、贴壁情况）；用酒精棉对培养瓶外部进行擦拭.
4.将培养基倒掉,加PBS冲洗一下,如不需传代,加入5ml新鲜培养基即可；
5.传代：加1.5ml 0.1%Trp PBS冲洗一下（快速）；
6.加入3滴左右0.1%Trp PBS,37℃1分钟,轻敲瓶壁使大部分细胞脱落,加入3n（n为传代瓶数）ml培养基（DMEM）；
7.用吸管轻柔吹打,尽量让细胞均匀分散开来,各取出3ml至新瓶中；
8 .放入CO2培养箱（培养条件5％ CO2、饱和湿度、37℃ ）
这个是我做实验的时候用的protocol
看是否对你有所帮助~欢迎追问~