香樟叶片DNA提取方案?CTAB

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  • 1.将植物组织洗净,用75%的酒精表面消毒4-5min,用去离子水冲洗3次;

    2.将样品放在灭过菌的研钵中,加入液氮捣碎,迅速转入1.5ml离心管中,加入600mlCTAB(或同时加入石英砂和CTAB研磨,然 后转入1.5ml离心管中);

    3.65℃水浴1h(每20min反转摇匀一次);

    4.加等体积的氯仿-异戊醇(体积比24:1),颠倒混匀;

    5.6500rpm离心30min,取上清于新管中;

    6.重复4,5步骤;

    7.向上清中加入2倍体积的无水乙醇沉淀DNA,-20℃放置20min或更长时间,或过夜;

    8.12000rpm离心5min,去上清;

    9.加75%的乙醇清洗DNA,每次12000rpm 2min,去上清;

    10.风干后加入40ul的TE缓冲液溶解DNA;

    11.取2ul溶液电泳检测.