用凯氏定氮测蛋白质时,消化用多长时间?

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  • 消化时应注意,样品消化液必须含有过量的硫酸,以防止氨的损失.

     消化时间要掌握好,时间过长会引起氨的损失;消化时间不够,消化不完全也会导致总氮量偏低.

     对于高脂肪的物质(脂肪>10%),所需酸的量要多2~3毫升,消化时间也相应长一些;或加入酸后,隔夜再消化.如果冒泡成问题,可以缓慢地加入3 mL 30~35%过氧化氢来减少冒泡,待过氧化氢反应后才能进行下一步操作.

     硫酸钾与硫酸用量的比值是消化成功的关键,它决定酸的沸点,也决定消化所需的时间.但比值不宜过大,一般比值为1:2.比值过大,沸点太高,生成的硫酸氢铵就分解放出氨,使氮损失.