72°C延伸时间适当延长 按1000bp/分钟计算,可以先扩增重叠的几个片段,然后再利用测序正确的这些片段互作“引物”扩增最后的大片段.还有酶的保真性的问题,片段长了出错的机会也增加.
现在公司都可以化学合成.不用自己扩.PCR实验摸条件是一个艰辛的过程.
72°C延伸时间适当延长 按1000bp/分钟计算,可以先扩增重叠的几个片段,然后再利用测序正确的这些片段互作“引物”扩增最后的大片段.还有酶的保真性的问题,片段长了出错的机会也增加.
现在公司都可以化学合成.不用自己扩.PCR实验摸条件是一个艰辛的过程.