做克隆时,请问在引物前加的一段保护碱基和内切酶序列需要和cDNA互补吗?

2个回答

  • 不需要,引物的5‘端可以进行修饰,3’端需要严格保证与cDNA互补.举个例子

    cDNA：ATGatcgatcgatcgTAA

    引物：gg catatg TACtagcta

    其中gg为保护碱基,catatg为NdeI酶切位点,都无须与模板配对,引物后面序列需要保证配对.

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