某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性.供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞

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  • 解题思路:1、动物细胞培养的过程:取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中(原代培养)→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞,制成细胞悬液→转入培养液(传代培养)→放入二氧化碳培养箱培养.

    2、动物细胞培养的条件:

    (1)无菌、无毒的环境:①消毒、灭菌;②添加一定量的抗生素;③定期更换培养液,以清除代谢废物.

    (2)营养物质:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等,还需加入血清、血浆等天然物质.

    (3)温度和PH.

    (4)气体环境:95%空气(细胞代谢必需的)和5%的CO2(维持培养液的PH).

    (1)肝肿瘤细胞比正常肝细胞的分裂能力强,细胞周期短,因此在其他条件相同时,相同时间内肝肿瘤细胞产生的子代细胞多.

    (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质(如促细胞生长因子等),因此在动物细胞培养时,通常要在合成培养基中加入适量血清;细胞培养应在含有5%CO2的恒温培养箱中进行,其中CO2的作用是维持培养液pH.

    (3)甲细胞为肿瘤细胞,已经失去接触,而乙细胞为正常肝细胞,存在接触抑制,因此在这两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长停止.甲细胞能无限增殖,因此其传代的次数比乙多;胰蛋白酶能消化组织细胞间的蛋白质,使组织细胞分散成单个细胞.

    (4)培养瓶中加入抗生素可以抑制细菌的活动.

    (5)该实验的目的是试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,因此自变量为是否加入Y,B组细胞培养液中加入等量无菌生理盐水,则A组细胞培养液中应加入等量Y.已知基因X表达与肝肿瘤的发生密切相关,而基因X的表达包括转录和翻译两个步骤,抗癌药物Y的作用可能是抑制基因X的转录过程,也可能是抑制其翻译过程,因此通过分别检测基因X在A、B两组细胞中的mRNA或相关蛋白质合成水平的差异,可以确定Y的药效.

    故答案为:

    (1)多

    (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质 维持培养液的pH

    (3)停止多 胰蛋白酶

    (4)抗生素

    (5)YmRNA 蛋白质

    点评:

    本题考点: 动物细胞与组织培养过程.

    考点点评: 本题以药物试验为背景,考查癌细胞的主要特征、动物细胞培养、探究实验,要求考生识记动物细胞培养的过程及动物细胞培养的条件;识记癌细胞的主要特征;明确实验的目的,理解实验的原则,能结合转录和翻译的过程答题.

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