解题思路:分析题图:①表示目的基因的获取过程,A是目的基因;B是质粒,I和II表示抗性基因,且I是四环素抗性基因,II是氨苄青霉素抗性基因;③④表示基因表达载体的构建过程,需要用限制酶和DNA连接酶,D是重组质粒;⑤表示将目的基因导入受体细胞的过程;⑥⑦是培养选择过程,即筛选含有重组质粒的大肠杆菌.
(1)由以上分析可知:A是目的基因;D表示重组质粒;由于在四环素抗性基因中存在限制酶的单一识别序列,所以I表示四环素抗性基因,II表示氨苄青霉素抗性基因.
(2)A和B→D表示基因表达载体构建过程,该过程首先需要限制酶处理含有目的基因的外源DNA分子和质粒,形成黏性末端,其次需要DNA连接酶将目的基因和质粒连接形成重组质粒,因此需的酶有限制酶和DNA连接酶.⑤表示将目的基因导入受体细胞的过程,为了使目的基因导入大肠杆菌,常用CaCl2处理大肠杆菌.
(3)能够在氨苄青霉素的培养基中生长的细菌菌落能够抗氨苄青霉素.在构建基因表达载体时,氨苄青霉素抗性基因未被破坏,所以含有物质A的细菌能在含有氨苄青霉素的培养基上生长;但四环素抗性基因被限制酶破坏了,所以含有物质A的细菌不能在四环素的培养基上生长,由此可见,图中菌落3和5即为筛选出的含有物质A的细菌.
(4)从功能上来说,上述培养基属于选择培养基.配制培养基的过程为:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板.在各成分都溶化后分装前,要进行定容和调pH值.培养基配制后采用高压蒸汽灭菌以杀灭细菌芽孢.
故答案:(1)目的基因 重组质粒 氨苄青霉素抗性基因
(2)限制酶和DNA连接酶 将重组质粒导入受体细胞
(3)抗氨苄青霉素 3、5 由于目的基因破坏了四环素抗性基因,使受体细胞不能在含有四环素的培养基上生长,所以该菌落就是筛选的含有目的基因的菌落
(4)选择 定容 调pH值 杀灭细菌芽孢
点评:
本题考点: 基因工程的应用.
考点点评: 本题考查基因工程、微生物的实验室培养等知识,意在考查考生的