菲林试剂为什么不能直接用来鉴定蛋白质

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    (1)溶液浓度不同

    斐林试剂中乙液为0.05g/ml的CuSO4溶液,双缩脲试剂中CuSO4溶液为0.01g/ml

    (2)使用原理不同

    斐林试剂是新配制的溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在.用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀).

    鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应.双缩脲反应实质是在碱性环境下的与双缩脲试剂发生的紫色反应.而蛋白质分子中含有很多与双缩脲()结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生颜色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在.

    (3)使用方法不同

    斐林试剂使用时,先反溶液和溶液混合(将滴溶液滴入溶液中),而后立即使用,需要加热.

    双缩脲试剂使用时,先加入溶液(2mL),振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴溶液,振荡摇匀后观察现象.

    (4)颜色反应不同

    斐林试剂与还原糖混合是产生砖红色沉淀,双缩脲试剂与蛋白质反应产生紫色反应.