通过Rf与分配系数公式我们知道.Rf与分配系数、流动相与固定相的体积有关,由于体积比在同一实验条件下是常数,所以Rf只与分配系数有关.而分配系数取决于氨基酸的极性基团,而碳链的影响则对Rf影响甚微.
溶剂系统对氨基酸的影响两方面.氢键影响涉及两相暂不讨论.
一、极性方面,溶剂极性增加,物质的Rf变大.增加酸碱,也就是增大了溶剂的极性.从而提高物质的Rf.
二、PH值影响,氨基酸的解离度与PH 有关,解离度越大极性越强,极性强的物质在两相分配时,偏向极性的一项.氨基酸解离度越大,Rf越小.（PH值对中性氨基酸的影响不大）
你往溶剂系统中对于加入碱,对于酸性氨基酸来说,羧基会更多的解离,自然Rf降低（这个效果会很明显）.而对于碱性氨基酸的盐溶液来说,解离度降低,Rf增大（这个 效果不会太明显,因为大部分都是以离子形式存在,解离度变化不大）.
你往溶剂加酸,对于酸性氨基酸来说,羧基变化不大,氨基接受质子更多解离,Rf降低.对于碱性氨基酸,解离度增大,Rf也减小
PH值对Rf的影响其实质 是让你判断氨基酸的解离度（仅限酸碱氨基酸,PH对中性氨基酸影响不大）
当然以上判断不是绝对,需要根据再等电点左右,必须根据解离度变化来,而要计算解离度就需要各基团Pka值.只有 解离度增大Rf才一定变小,解离度变小Rf才会一定增大.