微生物学中EC培养基组成成分是什么?

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    EC培养基配制

    1)成份

    胰蛋白胨或示胨 20.0g

    乳糖 5.0g

    胆盐混合物或3号胆盐 1.5g

    磷酸氢二钾(K2HPO4·3H2O) 4.0g

    磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.5g

    氯化钠(NaCl) 5.0g

    蒸馏水 1000mL

    2)制法

    将上述成份加热溶解,分装于内装倒管的试管中,同上灭菌后pH值应为6.9.此培养基用前不宜置入冰箱,以防检测时出现假阳性.

    B.3.1.3 检验步骤

    a) 初发酵试验

    1) 生物样品在无菌操作条件下取全组织样放入无菌玻璃研钵中研磨,研磨后用特殊加工的大口移液管无菌移取1.0克样品至9.0毫升无菌海水的试管中,制备成10-1稀释样.然后,用一系列装有9.0毫升无菌海水的试管连续稀释,制备成10-2、10-3、10-4稀释样.

    2) 吸取上述10-1 、10-2、10-3稀释样,每个稀释度各取1mL稀释样5份,分别加入5支盛有10mL已灭菌的普通浓度乳糖蛋白胨培养液的试管中(内有倒管).

    3) 将上述15支试管充分混匀后,置于44℃恒温箱中培养24h.

    b) 复发酵试验

    经培养24h后,将产酸(培养液变成黄色)产气(倒管上端积有气泡)及只产酸的发酵管,用一无菌环(3mm直径)或木压舌板转接入EC培养液中,摇匀后置44±0.5℃恒温箱中培养24±2h.在此期间内所得的产气阳性管即证实有粪大肠菌群存在.

    依据阳性管数查对照表B.1,即可得每g生物样中粪大肠菌群的最近似值(MPN).

    若海生物样污染较严重,接种后15管全部产酸产气时,可将接种量减少为十分之一,即1mL的5管,0.1mL(1-9稀释的1mL)5管,0.01mL(1+99稀释的1mL)的5管.此时,由表B.1查得的每1/10g生物样中的大肠菌群数.