5月7日 19:50 限制性核酸内切酶根据其功能可分为一级和二级两大类.在基因重组,基因解析方面广泛使用的是二级,一般情况下识别由4~8个碱基构成的特定序列有选择地将其切断.一级限制性核酸内切酶则跟特定的碱基序列结合,切断位置上不具有特异性.
以典型的二级限制性核酸内切酶EcoRI为例,识别5’-GAATTC-3’这一序列（双链中的另外一条链为3’-CTTAAG-5’）将各链上连接G（鸟嘌呤）和A（腺嘌呤）之间的磷酸二酯键切断生成两个DNA的断片.
由该例子可见,在许多场合,限制性核酸内切酶识别的地方是一个回文序列（palindrome）,在这个位置上呈锯齿状切断后给生成断片的末端一个单链部分（叫做附着末端）用同一种限制性核酸内切酶切断的断片的末端是互相吻合的,所以使用连接酶就很容易把这些结合起来.这就是 “剪刀与糨糊”这种说法的由来.