分光光度法
在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与众不同波长相对应的吸收强度.如以波长（λ）为横坐标,吸收强度（A）为纵坐标,就可绘出该物质的吸收光谱曲线.利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法,称为分光光度法,也称为吸收光谱法.用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分光光度法；用可见光光源测定有色物质的方法,称为可见光光度法.它们与比色法一样,都以Beer-Lambert定律为基础.上述的紫外光区与可见光区是常用的.但分光光度法的应用光区包括紫外光区,可见光区,红外光区.
比色法
colorimetry
以可见光作光源,比较溶液颜色深浅度以测定所含有色物质浓度的方法.
以生成有色化合物的显色反应为基础,通过比较或测量有色物质溶液颜色深度来确定待测组分含量的方法.比色法作为一种定量分析的方法,开始于19世纪30～40年代.比色分析对显色反应的基本要求是：反应应具有较高的灵敏度和选择性,反应生成的有色化合物的组成恒定且较稳定,它和显色剂的颜色差别较大.选择适当的显色反应和控制好适宜的反应条件,是比色分析的关键.
常用的比色法有两种：目视比色法和光电比色法,两种方法都是以朗伯-比尔定律(A＝εbc)为基础.常用的目视比色法是标准系列法,即用不同量的待测物标准溶液在完全相同的一组比色管中,先按分析步骤显色,配成颜色逐渐递变的标准色阶.试样溶液也在完全相同条件下显色,和标准色阶作比较,目视找出色泽最相近的那一份标准,由其中所含标准溶液的量,计算确定试样中待测组分的含量.
光电比色法是在光电比色计上测量一系列标准溶液的吸光度,将吸光度对浓度作图,绘制工作曲线,然后根据待测组分溶液的吸光度在工作曲线上查得其浓度或含量.与目视比色法相比,光电比色法消除了主观误差,提高了测量准确度,而且可以通过选择滤光片来消除干扰,从而提高了选择性.但光电比色计采用钨灯光源和滤光片,只适用于可见光谱区和只能 得到一定波长范围的复合光 ,而不是单色光束,还有其他一些局限,使它无论在测量的准确度、灵敏度和应用范围上都不如紫外-可见分光光度计.20 世纪30～60年代,是比色法发展的旺盛时期,此后就逐渐为分光光度法所代替.