需要测蛋白质中氨基酸序列,根据氨基酸的密码与反密码,推测cDNA序列设计上游或下游引物.进行PCR,争取扩展出目的基因.待扩展出来,作为目的基因在别的微生物中表达,看是否能表达出目的蛋白.
如该酶是由几个基因共同调控的,那可能就需要仔细考虑一下了.而且如没有分泌出该蛋白可能是没有在生物体中进行修饰.所以还需要考虑多种情况.
分离到一株具有某一潜在价值的酶的微生物,该酶是第一次发现,请设计一种方案克隆
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