解题思路：基因分离的实质是减数分裂形成配子时，控制一对相对性状的等位基因随着同源染色体的分开而分离，分别进入子细胞中．
A、F2表现型的比为3：1，属于性状分离，A错误；
B、F1在减数分裂形成配子时，等位基因随着同源染色体的分开而分离，产生配子的比为1：1，B正确；
C、F2基因型的比为1：2：1，是产生的配子随机结合形成的，属于结果而不是实质，C错误；
D、测交后代比为1：1，是检测F1基因型的，不能说明基因分离定律的实质，D错误．
故选：B．
点评：
本题考点： 基因的分离规律的实质及应用．
考点点评： 本题考查了分离定律的实质，意在考生学生的识记能力和理解能力，难度不大．