解题思路:分析题图:图示表示基因表达载体的构建过程,载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点,所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52,再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体.
(1)以RNA为模板合成cDNA称为逆转录(反转录),该过程需要模板(RNA)、酶(逆转录酶和DNA聚合酶)、原料(脱氧核苷酸)和能量.采用PCR技术扩增获取目的基因时需要模板(cDNA)、酶(热稳定DNA聚合酶)、原料(脱氧核苷酸)、引物.因此,根据已知目的基因的核苷酸序列,合成引物、通过PCR扩增获取目的基因,此时需要加入的反应物与生成cDNA时所加反应物不同的是:模板cDNA、耐高温(热稳定)DNA聚合酶(Taq酶)、引物.
(2)由图示可知载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的识别位点和切割位点,所以酶切载体和目的基因用的是两种限制酶EcoRⅠ与EcoR52,重组载体实际上是重组DNA,因而其化学本质是DNA.
(3)白细胞介素可治疗癌症,因此可推知白细胞介素可抑制肿瘤细胞的增殖.因此利用纯化的产物进行细胞培养实验,可研究人白细胞介素抑制肿瘤细胞增殖的作用.
故答案为:
(1)反转录模板cDNA热稳定DNA聚合酶引物
(2)两种限制酶EcoRⅠ与EcoR52 DNA
(3)促进淋巴细胞增殖(抑制肿瘤细胞增殖)
点评:
本题考点: 基因工程的原理及技术.
考点点评: 本题结合图解,综合考查免疫、基因工程、PCR技术、微生物的培养和分离等知识,要求考生识记人体免疫细胞的组成及特异性免疫过程;识记基因工程的工具及操作步骤;掌握纯合微生物的方法,能运用所学的知识答题.