最近做小麦种子中蛋白质淀粉含量测定实验,分别用的是凯氏定氮和旋光法,那在这之前种子怎么提取蛋白淀粉

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  • 小麦种子中蛋白质淀粉样品中蛋白质提取:

    (1)准确称取小麦粉 0.5克,放入研钵中,加 2ml0.1mol/L NaOH,研磨成匀

    浆,转入到10ml离心管中,再用6ml 0.1mol/ L NaOH分三次洗涤研钵,洗液一

    并转入10ml离心管中,用玻棒搅拌,放置30分钟,放置过程间断搅动数次.

    3500rpm离心15分钟,上清液转入 50ml容量瓶中,用蒸馏水定容到刻度,摇

    匀,得碱溶性蛋白.

    (2)将上述沉淀用70%乙醇重复提取,操作步骤同上,得醇溶性蛋白.

    准确称取2g稻米淀粉样品,放入研钵,先磨成粉末状,然后加3ml 1mol/L

    HCL溶液研磨成匀浆,再加 5ml 1mol/L HCL研磨,将溶液转入50ml容量瓶

    中.用20ml蒸馏水分次冲洗研钵,洗液一并倒入容量瓶中,摇匀后,放入沸水

    浴中煮沸,间隔摇动(其间打开容量瓶塞子).加热15分钟后,稍冷却,加

    5ml 4%磷钨酸,并用蒸馏水定容至刻度,混匀.静置5分钟,将溶液过滤到一

    干净烧杯中,此时滤液应澄清透亮.将滤液装入2分米长旋光管,测定其旋光

    偏振角α值.