解题思路：DNA复制过程有A-T，C-G，T-A，G-C的配对方式，基因表达包括转录和释放，转录过程有A-U，C-G，T-A，G-C的配对方式，翻译过程有A-U，U-A，C-G，G-C配对方式．
①遗传信息的复制和表达过程都遵循碱基互补配对原则，①正确；
②、真核细胞内转录产物进入到细胞质中通过核孔，穿过0层生物膜，②错误；
③、氨基酸有20种，tRNA有61种，所以在翻译过程中，每种氨基酸只能由一种或多种tRNA转运，③错误；
④、DNA复制和基因表达过程，在形成磷酸二酯键时有水的生成，④正确；
⑤、胰岛素合成后需要经过内质网和高尔基体的修饰、加工，而大肠杆菌没有内质网和高尔基体，⑤错误；
⑥、转录的产物是mRNA，需要四种核糖核苷酸，翻译的产物是蛋白质，需要20种氨基酸，⑥正确．
故选：D．
点评：
本题考点： DNA分子的复制；遗传信息的转录和翻译．
考点点评： 本题考查基因表达，理解基因表达的过程是解题的关键．