有哪些生化手段可以获得保留天然活性的蛋白质制剂?操作上该注意哪些方面?

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  • 亲和层析,凝胶过滤,盐析,透析,真空冻干

    避免与变性剂接触,水溶液中保持适当的离子浓度和温度,防止反复冻融以及极端PH,避免蛋白质沉淀.4度操作,-20度保存溶液,如果是干粉可以4度保存,但是一定要蒸干,且不能使用磷酸盐缓冲液冻干.

    必要时使用蛋白酶抑制剂防止分解.

    透析(或者超滤)可除去变性剂,小分子,小肽等杂质,超滤还可以浓缩蛋白

    任何操作时间都不宜过长,4度保存时间不宜超过三天,易降解,当然无菌也是很重要的.