量子点-蛋白交联制备.在100微升的10mM四硼酸钠缓冲液(pH 9)中加入适量Cy3标记的和未标记的MBP制备成生物交联配合物.约24 pmol的DHLA封顶量子点被添加到MBP溶液,并在室温下自体组装～15分钟.MBP-Cy3相对于量子点的摩尔比在不同样品中有从0到10的离散变化,而MBP(标记和未标记)对量子点的整体比例维持在15(参见图1).然后每个样品用四硼酸钠缓冲液稀释至3毫升的总体积.稀释后的溶液被放置在一个10毫米的石英荧光比色皿光程(远紫外,Spectrocell,Oreland,宾夕法尼亚州),发射光谱测量采用SPEX Fluorolog-2荧光计(Jobin Yvon公司/ SPEX仪,Edison,新泽西州).所有样品的激发均在430 nm,此波长接近Cy3吸收光谱最低点以便减少受主直接激发造成的干扰(见图2).
此外,从溶液光谱中减去了MBP-Cy3结合物在没有量子点施主时记录的控制谱,以消除直接激发产生的染料发射造成的影响.为了避免内部过滤效应,所有实验的量子点交联制备都用了激发线在0.05以下的光密度(OD).