双缩脲浓度是固定的.
双缩脲试剂中溶液NaOH（双缩脲试剂A）的浓度为0.1g/ml,溶液CuSO4（双缩脲试剂B）的浓度为0.01g/ml.
双缩脲试剂使用时,先加入NaOH溶液（2mL）,振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振荡摇匀后观察现象.(不加热）
双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲发生的紫色反应.而蛋白质分子中含有很多与双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在.