表达载体四部分：目的基因、启动子、终止子、标记基因 常用细菌质粒进行构建,构建过程中运用限制性核酸内切酶切割出与目的基因相合的末端（多为黏性末端,也有平末端）,采用DNA连接酶连接,导入生物体实现表达.标记基因可帮助识别质粒并检测是否成功整合到染色体DNA中. 表达载体（Expression vectors）就是在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RBS、终止子等）,使目的基因能够表达的载体.如表达载体pKK223-3是一个具有典型表达结构的大肠杆菌表达载体.其基本骨架为来自pBR322和pUC的质粒复制起点和氨苄青霉素抗性基因.在表达元件中,有一个杂合tac强启动子和终止子,在启动子下游有RBS位点（如果利用这个位点,要求与ATG之间间隔5-13bp）,其后的多克隆位点可装载要表达的目标基因.