(2008•广东)天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类,用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用.研究者从某

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  • 解题思路:基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体;基因工程操作的步骤为提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达.目的基因的检测有多种手段,如①DNA分子杂交技术;②分子杂交技术;③抗原-抗体杂交技术.微生物在基因工程具有重要的作用,如获取运载体,用来生产多肽药物等.

    (1)将目的基因(淀粉酶基因)切割下来所用的工具是限制酶,将淀粉酶基因和运载体连接起来需要DNA连接酶,之后将重组DNA分子导入受体细胞,以完成工程菌的构建.

    (2)检测目的基因是否导入受体细胞,可采用DNA分子杂交技术;要鉴定目的基因是否翻译成蛋白质,可采用抗原抗体杂交技术;因为该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基,水解淀粉后的区域,遇碘不再变蓝色,产生透明圈.所以也可以通过检测淀粉酶活性来检测目的基因是否翻译成蛋白质,即将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上,培养一定时间后,加入碘液检验,并检验工程菌菌落周围是否出现透明圈.

    (3)测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量,可以鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小.

    (4)基因工程领域中微生物的应用:①工具酶主要来自微生物;②最重要的目的基因供体库之一;③目的基因的载体之一;④作为受体细胞;⑤提供用于发酵的工程菌.

    故答案为:

    (1)限制酶(限制性内切酶) DNA连接酶 导入受体细胞

    (2)DNA分子杂交技术 抗原-抗体杂交或淀粉酶活性 该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基,水解淀粉后的区域,遇碘不再变蓝色,产生透明圈

    (3)测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量

    (4)①工具酶主要来自微生物;②最重要的目的基因供体库之一;③目的基因的载体之一;④作为受体细胞;⑤提供用于发酵的工程菌

    点评:

    本题考点: 基因工程的原理及技术;基因工程的应用.

    考点点评: 本题考查基因工程的相关知识,要求考生识记基因工程的工具和操作步骤,能应用基因工程技术培育获得的酿酒酵母工程菌,属于考纲识记和理解层次的考查,这类试题需要考生在平时的学习过程中学会构建知识网络结构.