(2014•长宁区二模)λ噬菌体有极强的侵染能力,能在细菌中快速进行DNA复制,产生子代噬菌体,最终导致细菌破裂(称为溶

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  • 解题思路:分析题图:λ噬菌体的DNA包括分为左臂(含编码蛋白质外壳序列)、中臂(含控制溶原生长序列)和右臂(含重要调控序列).λ噬菌体的DNA经过人工改造后可形成λgt10载体(长43.4kb).在转基因技术中常用λ噬菌体构建基因克隆载体,使其在受体细菌中大量扩增外源DNA,进而构建基因文库.

    (1)由于组装噬菌体时,可被噬菌体蛋白质包装的DNA最大长度是51kb,经人工改造λgtl0载体的长度为43.4kb,那么插入的外源DNA的最大长度是7.6kb.由于λ噬菌体DNA中分为三段,左臂是含有编码蛋白质外壳的序列,中臂是控制溶原生长的序列,而右臂是含重要调控序列,所以人工改造载体时,可删除的是中臂.

    (2)基因工程中需要用到限制酶和DNA连接酶来切割和拼接DNA片段.由于采用的标记基因,即imm434基因,能编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物,所以外源DNA应该插入该基因之中,这样就使得经侵染培养后的受体菌处于溶菌状态.

    (3)溶原是指噬菌体的DNA整合到细菌基因组中潜伏起来,不产生子代噬菌体,与HIV逆转录后DNA整合到人T细胞的DNA中很相似.

    (4)如图目的基因用15N标记,且在一个受体细胞的溶菌状态时释放出32个子代噬菌体中,由于DNA的半保留复制,子代噬菌体中含15N的始终有2个,而所有的子代噬菌体中均含14N,因此含14N和15N的噬菌体比例是16:1.

    故答案为:

    (1)7.6kb中部

    (2)限制酶和DNA连接酶 之中

    i mm434基因,能编码一种阻止λ噬菌体进入溶菌状态的阻遏物,所以外源DNA应该插入该基因之中,这样就使得经侵染培养后的受体菌处于溶菌状态

    (3)HIV逆转录后DNA整合到人T细胞的DNA中很相似

    (4)16:1

    点评:

    本题考点: 基因工程的原理及技术;DNA分子的复制.

    考点点评: 本题结合λ噬菌体载体克隆外源DNA片段的操作流程,考查基因工程、噬菌体侵染细菌的实验,要求考生认真分析题图,了解λ噬菌体的DNA结构,理解λ噬菌体的溶菌状态和溶原状态,能结合图中信息答题;掌握噬菌体侵染细菌的过程,明确噬菌体侵染细菌时只有DNA进入细菌,而蛋白质外壳留在细菌外.