解题思路：叶绿体的观察要选择植物绿色部位的细胞，内含有叶绿体．将叶片的横切片制成临时装片，就可以在显微镜下观察到叶绿体．某些植物幼嫩的叶也可直接用于观察叶绿体．
A、藓类的叶片为单层细胞，具有叶绿体，可直接观察，A正确；
B、黄杨叶横切片，具有叶绿体，可直接观察，B正确；
C、菠菜叶下表皮或附着在下表皮上的少数叶肉细胞，具有叶绿体，可直接观察，C正确；
D、植物的叶片具有叶绿体，但细胞为多层，不能直接观察，D错误．
故选：D．
点评：
本题考点： 观察线粒体和叶绿体．
考点点评： 本题借助于考查观察叶绿体实验，考查实验中材料的选择与实验操作，明确选材要具有叶绿体，且适合显微镜观察．