这就是五变参数:
蛋白质含量,离子强度,溶液pH值,乙醇浓度,溶液温度.
1.蛋白质含量,愈高,共沉多;反之,分离愈彻底.当然有度.溶液太稀了,成本高.
2.离子强度:这与介电强度有关.
3.溶液pH值:调到目标蛋白等电点周围.
4.乙醇浓度:一般来说乙醇浓度多少,与目标蛋白的分子量有关:比如8%,可沉淀纤维蛋白原,20%可沉淀球蛋白,40%可沉淀白蛋白等等,当然,乙醇浓度与溶液pH值配合使用.加入乙醇不能过快,防止局部过浓.要边加边摇动. 否则,共沉多!或者局部变性.
5.溶液温度:必须低温,乙醇反应是个放热反应,如果温度高,可引起蛋白质变性,不可逆的变形.
这五变参数,要综合,动态的调整,可达到精确分离蛋白质的作用.