,那个用水溶解后也需要加loading buffer沸水浴处理的.不过现在卖的很多都是那种直接点样的.说明书一般都有说的,一般10微升.
loading buffer就是上样缓冲液的英文.
另外,你的实验步骤里面,你打错了,第三步是10000rpm*2min,我非常肯定这个步骤一定是高速离心.
第一个步骤,我们一般取1ml菌液离心10000rpm*5min吧,具体记得不太清楚了.然后加loading buffer好像是120微升,1倍的,100微升也OK啦,然后沸水浴5到10分钟,然后高速离心,点样.为了避免串样,维持各点样孔之间的那种压力吧,具体怎么说我记不清楚了,反正就是防止别的孔的样品跑到空白泳道,很难看的.所以在空白处也点上1倍的loading buffer
你按照一个固定的数字做下来,点样的时候开始要摸索一下,多点几个样,看看点多少微升合适,因为你的菌液浓度什么的我们也不知道.你要有条件,可以给蛋白定量,因为跑电泳蛋白浓度过高会很难看,浓度低了看不清楚.