最强且最有用的荧光物质多是具有较低能量差的π→π*跃迁产生的,即荧光物质分子中一定具有共轭双键这样的强吸收结构.几乎所有分析化学有用的荧光体系都含有一个以上的芳香基：如罗丹明B,8-羟基喹啉,桑色素.
影响物质荧光强弱的主要结构因素：
1、跃迁类型
π→π*跃迁是产生荧光的主要跃迁类型,所以绝大多数能产生荧光的物质都含有芳香环或杂环.
2、体系的共轭度增加,荧光效率一般也将增大.
3、荧光效率高的物质,其分子多是平面构型,且具有一定的刚性.
4、取代基效应.芳烃和杂环化合物的荧光光谱和荧光强度常随取代基而改变.
如取代基存在,π电子的电子云与芳环上π电子能共平面,能扩大π电子共轭程度,可使荧光增强.
一般说来,给电子取代基如-OH,-NH2,-OR,-NR2等能增强荧光；而吸电子取代基如-NO2,-COOH,-C=O,卤素离子等使荧光减弱.