酶是蛋白质,因此一般蛋白质的分离原则都应该遵行.但酶作为特殊的蛋白质,最重要的原则是一定在纯化过程中保持酶的活性,所以纯化过程中一般要注意保持低温、缓冲液配方避免酶的抑制.每个步骤都要检测酶活性,一方面直观了解纯化的回收率,另一方面可以计算酶的纯度.
酶的分离纯化方法一般根据酶的分子量、等电点、疏水性等生化性质,选择相应的沉淀、盐析、层析方法,其中亲和层析可以应用可逆性底物作为配基或特异性抗体,制备亲和层析胶.
酶是蛋白质,因此一般蛋白质的分离原则都应该遵行.但酶作为特殊的蛋白质,最重要的原则是一定在纯化过程中保持酶的活性,所以纯化过程中一般要注意保持低温、缓冲液配方避免酶的抑制.每个步骤都要检测酶活性,一方面直观了解纯化的回收率,另一方面可以计算酶的纯度.
酶的分离纯化方法一般根据酶的分子量、等电点、疏水性等生化性质,选择相应的沉淀、盐析、层析方法,其中亲和层析可以应用可逆性底物作为配基或特异性抗体,制备亲和层析胶.