(三)多肽链的延长
在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位,转肽和移位三个步骤.
(1)为密码子所特定的氨基酸tRNA结合到核蛋白体的A位,称为进位.氨基酰tRNA在进位前需要有三种延长因子的作用,即,热不稳定的EF(Unstable temperature,EF)EF-Tu,热稳定的EF(stable temperature EF,EF-Ts)以及依赖GTP的转位因子.EF-Tu首先与GTP结合,然后再与氨基酰tRNA结合成三元复合物,这样的三元复合物才能进入A位.此时GTP水解成GDP,EF-Tu和GDP与结合在A位上的氨基酰tRNA
①核蛋白体“给位”上携甲酰蛋氨酰 基(或肽酰)的tRNA
②核蛋白体“受体”上新进入的氨基酰tRNA;
③失去甲酰蛋氨酰基(或肽酰)后,即将从核蛋白体脱落的tRNA;
④接受甲酰蛋氨酰基(或肽酰)后已增长一个氨基酸残基的肽键
(2)转肽--肽键的形成(peptide bond formation)
在70S起始复合物形成过程中,核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA,当进位后,P位和A位上各结合了一个氨基酰tRNA,两个氨基酸之间在核糖体转肽酶作用下,P位上的氨基酸提供α-COOH基,与A位上的氨基酸的α-NH2形成肽键,从而使P位上的氨基酸连接到A位氨基酸的氨基上,这就是转肽.转肽后,在A位上形成了一个二肽酰tRNA
(3)移位(Translocation)
转肽作用发生后,氨基酸都位于A位,P位上无负荷氨基酸的tRNA就此脱落,核蛋白体沿着mRNA向3’端方向移动一组密码子,使得原来结合二肽酰tRNA的A位转变成了P位,而A位空出,可以接受下一个新的氨基酰tRNA进入,移位过程需要EF-2,GTP和Mg2+的参加(图9).
以后,肽链上每增加一个氨基酸残基,即重复上述进位,转肽,移位的步骤,直至所需的长度,实验证明mRNA上的信息阅读是从5’端向3’端进行,而肽链的延伸是从氮基端到羧基端.所以多肽链合成的方向是N端到C端.
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