1.用oligo等软件检查引物和模板匹配度;
2.退火温度跨越太大,一般选用55到60度之间的程序足可以p出大多数条带.如果现在做不出来试试用其中较低的温度如55度试试.
3.别忘了做阳性对照,看看是不是体系或者菌模板有问题