无语,Tm的算法和GC含量的算法是不同的,最常用的引物的Tm通常是用“近邻分析法”,在理想状态下,退火温度足够低,以保证引物同目的序列有效退火,同时还要足够高,以减少非特异性结合.合理的退火温度从55℃到70℃.退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃.
我设计的引物CG含量相同,但是tm差很多,为什么呢?
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