最大的问题应该是:大肠杆菌是原核生物,动物基因是真核基因,直接用限制酶切获得的基因在大肠杆菌内表达会错误,应该选择动物的相应基因的mRNA反转录得到DNA,或者根据相应蛋白质的氨基酸排列顺序推测DNA的碱基序列获得DNA.
其余的如楼上后面所答.