如何建立反相高效液相色谱的分析方法

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  • 首先,根据物质的紫外吸收确定波长.

    比如A物质扫描全波长紫外图谱,确定它在254nm波长下有最大吸收,另外有末端吸收,那么波长就可以选择254nm或者210nm;

    其次,根据物质的极性选择色谱柱和流动相比例.比如极性很小的物质,就可以把流动相中的有机相比例增大.

    另外的一些要根据物质的特性来选择,比如色谱峰容易拖尾,可选择缓冲盐和扫尾剂,比如某些酸性化合物或者碱性化合物可以用离子对试剂.

    其他的类似于水相pH值、柱温等条件要根据实际情况来调节.比如主物质和杂质峰分不开之类的情况,不过属于微调了.