博凌科为的THERMOscript 1st Strand cDNA Synthesis Kit（第一链耐热反转录试剂盒）反转录温度耐受性比较强,效果不错
本制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型 RNase H 活性缺失的 M-MuLV 反转录酶
THERMOscript Hˉ RTase .同时经过多点突变,提高了反转录温度耐受性,可以在 45-55℃进行反转录.野生型的 M-MuLV 包含的 RNase H 活性能够催化降解 DNA/RNA 杂合体中的 RNA,因此 在 cDNA 第一 条链的 合成 反应中 可能 会降 解 RNA/DNA 杂合 体中的 模板 RNA .本酶
M-MuLV(RNase Hˉ)的 RNase H 活性缺失,与 M-MuLV 相比,具有更强的延伸能力和稳定性,
可用于较长的 cDNA 合成以及高比例的全长 cDNA 文库的构建等.同时更高的反转录温度大大的
提高了 GC 含量高,二级结构丰富的 RNA 模板的反转录效率.
注意事项::
1、 避免RNase污染.
2、为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品.
3、如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构,可以先只加RNA模板、引物和和RNase free H2O混匀,65℃变性5分钟,冰上冷却,短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤.