最近在做qPCR,今天遇到个样品的浓度很低,想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线,于是照常做了.
结果最后的溶解曲线发现,头三个的Tm是84,之后的5个样品时77.从Ct值来看,也是头三个还有点像样,后面的Ct都是33-34.
很显然后面的5个应该不是扩增产物,应该是奈不住寂寞的引物二聚体之类的非目的产物.
还是补个图吧,意思一下就是啦.这只是一时手痒做的,不是很好啦.
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如何确定引物二聚体和扩增产物的Tm值?
最近在做qPCR,今天遇到个样品的浓度很低,想看看能不能做出样品10倍梯度稀释的曲线,于是照常做了.
结果最后的溶解曲线发现,头三个的Tm是84,之后的5个样品时77.从Ct值来看,也是头三个还有点像样,后面的Ct都是33-34.
很显然后面的5个应该不是扩增产物,应该是奈不住寂寞的引物二聚体之类的非目的产物.
还是补个图吧,意思一下就是啦.这只是一时手痒做的,不是很好啦.
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