解题思路：基因工程技术的基本步骤：
1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．
A、基因治疗是基因工程技术的重要应用之一，而基因工程的原理是基因重组，A正确；
B、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的，B错误；
C、将目的基因与载体结合在一起，首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，其次还需要用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组质粒，C正确；
D、目的基因成功导入受体细胞后不一定能成功表达，因此即使检测出受体细胞中含有目的基因，也不能说明基因工程就一定成功，D错误．
故选：C．
点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．
考点点评： 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，能结合所学的知识准确判断各选项，属于考纲识记和理解层次的考查．