2.4 化学和微生物分析
在试验日粮干物质和粗蛋白含量的分析中,排泄物和益生菌产品是根据AOAC（1990）方法（分别为930.05和976.05 ）分析.使用弹式量热计（model 1261, Parr Instrument Co., Moline, IL）测定总能量,根据芬顿博士（1979）的使用自动化分光光度计确定铬浓度.
第14和28天排泄物样本和第28天的肠道消化物的微生物分析,将样品在不同培养基中培养,测定总厌氧菌（胰酶解物大豆琼脂),双歧杆菌（MRS培养基）,乳杆菌种（MRS培养基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸盐酸盐水化合物）,梭菌属某些种（TSC培养基）和大肠杆菌群（紫色红胆汁琼脂）.通过培养技术对"益生菌"产品进行了微生物分析.嗜酸乳杆菌用MRS培养基＋0.02% NaN3+0.05%L胱氨酸盐酸盐水化合物培养,枯草芽孢杆菌通过琼脂培养基平板计数,酵母菌和米曲霉菌通过土豆葡萄糖培养基计数.通过使用厌氧袋厌氧系统创造厌氧条件,(BBL, No. 260678; Difco, Detroit, MI).大豆胰酶解物的琼脂(No.236950),MRS琼脂培养基(No. 288130),结晶紫中性红胆盐琼脂(No.216695),平板计数琼脂(No. 247940),和马铃薯葡萄糖培养基(No. 213400)的使用是从Difco实验室（(Detroit,MI)购买的,和TSC培养基是从Oxoid (Hampshire, UK)购买的.益生菌产品的pH值由pH计(Basic pH Meter PB-11, Sartorius,Germany).测定.
2.5 小肠形态学
每个肠道样本取三横截面,使用标准的石蜡包埋程序与天青A和曙红染色.共有10个完好无损,良好的导向隐窝绒毛单位被选定为每个肠道截面,每个样品一式三份的 (Jin et al.2008).从绒毛尖端绒毛到隐窝交界处测量绒毛高度,这个被定义为相邻绒毛内陷深度和隐窝深度.所有形态测量（绒毛高度和隐窝深度）通过使用一个图像处理的分析系统（擎天柱软件版本6.5,网络媒体遗传学,北读,MA）,增量为10-μm.