构建基因表达载体时,需要将外源基因（即要表达的基因）连接到表达载体上.
一般做法是：用限制性内切酶将表达载体切开,同时用同一种限制性内切酶去切割外源基因（不要破坏基因的完整性）,这样,表达载体和外源基因就会产生相同的黏性末端,再利用连接酶将二者连接在一起.这时,外源基因就插入到表达载体中了.
从上面可以看出,利用限制性内切酶的目的主要是使表达载体产生缺口,以便将外源基因连进去.如果可以通过其它方法（如同源重组）将外源基因连进表达载体,就可以不用限制性内切酶切割载体.
这句话是对还是错----构建基因表达载体时,必须用限制霉将运载体切开两个切口