解题思路：基因工程中目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物；常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性；载体上的抗性基因主要是有利于筛选含重 组DNA的细胞，不能促进目的基因的表达．
A、基因工程中受体细胞中常用植物受精卵或体细胞（经组织培养）、动物受精卵（一般不用体细胞）、微生物──大肠杆菌、酵母菌等，A正确；
B、常用的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶；常用的工具是限制性核 酸内切酶、DNA连接酶、运载体，B正确；
C、人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性，只有经过一定的物质激活以后，才有生物活性，C正确；
D、抗性基因是标记基因，是为了检测并筛选出载体有导入受体的细胞用的，它不会影响目的基因的表达． D错误．
故选：D．
点评：
本题考点： 基因工程的原理及技术．
考点点评： 本题主要考查了学生对基因工程的操作步骤的了解，这题内容较难．